어성초의 추출물에 따른 항산화력 연구

   지는 않는 것으로 알려져 있다[1]. 이러한 산화적 스트레 스로 인해 발생할 수 있는 질병으로는 암, 동맥경화증, 당 현대인들은 산화적 스트레스에 의한 노화와 질병에 시 뇨병, 면역관련 질환들, 퇴행성 신경질환들을 들 수 있다 달리고 있는데, 산화적 스트레스는 인체내에서 정상적인 [2]. 인체 내에서 정상적인 항산화 효소시스템을 운영하 영양소 대사과정에서도 발생되는 자연적인 현상으로 인 기 위해서는 항산화제의 역할이 무엇보다도 중요한데 일 체는 이러한 산화적 스트레스를 방어할 수 있는 항산화 반적으로 항산화제들은 식품으로 섭취하여 공급받고 있 효소시스템을 가지고 있어 세포손상이나 질병을 일으키 다. 따라서 항산화물질이 풍부한 식품을 섭취하여 효율적
대조군의 흡광도-시료의 흡광도 ⨯100 대조군의 흡광도으로 항산화제를 인체에 공급하는 것이 중요하다고 하겠 를 이용하여 농축하여 동결건조하여 냉동보관하면서 시 다. 이에 많은 연구자들이 식품으로써 안전하고 항산화물 료로 사용하였다. 질이 풍부한 식품을 만들기 위한 천연식물을 다각적으로 발굴하고자 노력하고 있다. 2.2 총 페놀함량 분석 어성초(Houttuynia cordata Thunb)는 삼백초에 속하는 일반적으로 항산화력을 나타내는 페놀의 함량을 측정 다년생 약초로써 비린내가 나는 식물로 알려져 있다[3]. 하는 방법으로[16], 추출 시료 용액 0.25 mL과 증류수 4 어성초는 전통약용작물로 잘 알려져 다양한 약물효능을 mL을 섞어 증류수와 1:1로 희석한 Folin-Ciocalteau's 시 가지는 것으로 널리 알려져 있는데 항바이러스[4], 항백 약 0.25 mL을 혼합하여 30초간 vortexing하여 5분간 반 혈병[5], 그리고 항암[6, 7]의 기능이 대표적으로 보고되고 응시킨 후, 포화된 sodium carbonate 0.5 mL을 첨가하여 있다. 이러한 다양한 약물학적 효능을 보이는 것은 어성 상온에서 30분간 정치하여, UV-VIS spectrophoto- meter 초의 추출조건에 따라 다른 생리활성물질들이 작용하는 를 이용하여 725 nm에서 흡광도를 측정하였다. 것으로 알려져 있는데 대표적인 생리활성 물질로는 essential oil [8], quercitin, hyperin의 flavonoids [9], alkaloids [10]등이 다량 존재하는 것으로 알려져 있다. 어 100% 메탄올로 용해시킨 0.1 mM DPPH 용액 3.75 성초에 관한 질병개선관련 연구에는 이외에도 Tian 등 mL에 추출 시료용액 0.25 mL을 섞어 10초간 vortexing하 [11]이 어성초차에 존재하는 풍부한 폴리페놀류가 사염 여 30분간 암소에서 반응시켰다. 30분 후에 UV-VIS 화탄소로 인한 간손상을 보호하는 효능이 있다고 하였고, spectrophotometer를 이용하여 517 nm에서 측정하였다 Li 등[12]은 어성초의 essential oil이 COX-2 유전자와 효 [16]. 대조군은 추출 시료용액과 동량의 메탄올 용액을 소를 억제하므로써 염증반응을 감소하는 것으로 나타났 처리하여 시료와 같은 과정을 실험하였다. DPPH 라디칼 으며 Kim 등[13]도 carrageenan으로 유도된 염증 동물모 소거활성은 아래의 식에 의해 계산하였다. 델에게 어성초추출물을 경구투여 하였더니 염증지표인 TNF-α와 NO를 감소시키는 것으로 관찰되었다. Kang 등 [14]도 gentamicin 으로 유도된 스트레스와 신장독성 동 ___________________________ Inhibition rate (%)= 물모델에게 어성초추출물을 경구투여 하였더니 산화적 스트레스를 감소시켰으며 신장 독성을 억제하여 주는 효 과를 보였다. 또한 어성초의 메탄올 추출물에 의한 항산 화 및 산화적 스트레스로부터 지질의 과산화로 인한 신 7 mM ABTS 수용액과 2.45 mM potassium persulfate 경세포 보호 효과를 나타내어 퇴행성 신경질환 등을 예 를 혼합하여 상온 암실에서 12시간 방치하여 ABTS 양이 방하는 효과도 볼 수 있었다[15]. 이와같이 항산화와 밀 온 라디칼을 형성한 후, ABTS 양이온 라디칼을 UV-VIS 접한 관련이 있는 간질환, 신장질환과 같은 염증증상 또 spectrophotometer 734nm에서 흡광도를 측정하여 0.700 는 신경세포 보호작용에 어성초추출물이 중요한 역할을 ± 0.050이 되도록 나오도록 완충용액으로 희석하여 맞추 하는 것으로 연구되었다. 따라서 본 연구를 통해 어성초 어진 ABTS 용액 1.9 mL과 추출 시료 용액 0.05 mL을 혼 물 추출물과 70% 에탄올 추출물의 항산화능을 총 페놀 합하여 6분간 암실에서 반응시켰다. 반응 후 734 nm에서 함량, DPPH 라디칼 소거능, ABTS 양이온 소거능 및 흡광도를 측정하였다. 대조군은 추출 시료용액과 동량의 FRAP 환원능을 측정하므로써 인체에 무해한 용매로 추 메탄올 용액을 처리하여 시료와 같은 과정을 실험하였다 출하여, 식용 가능한 항산화능이 풍부한 식재료로 활용될 [17]. 수 있도록 하려고 한다.* Corresponding Author : Soon Ah Kang(Hoseo Univ.) Tel: +82-2-2059-2353 email: Received September 23, 2013 Revised October 2, 2013
   Accepted October 10, 2013

   2.1. 추출물 제조 어성초 500g을 각각 물과 70% 에탄올 1:9로 넣어 믹 서기로 분쇄하여 3번 여과지로 여과하여 진공회전농축기
FRAP 환원능 분석은 0.3 M sodium acetate buffer(pH 3.6)와 40 mM HCl로 용해시킨 10mM 2,4,6-tripyridyl- S-triazine(TPTZ) solution, 20 mM FeCl3 solution을 사용 하여, 각각의 시약을 10:1:1의 비율로 혼합하여 37 °C 에서 10-15분간 반응시켜 FRAP 시약을 얻었다. FRAP시약 1.5 mL을 추출 시료 0.05 mL에 혼합하여 vortexing하여 상온
   에서 30분간 반응시킨 후 UV-VIS spectrophotometer 593 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로는 Trolox를 사 용하였다[18]. 2.6 통계처리 모든 실험결과는 평균±표준편차(SD)로 표현하였고, 각 군간의 차이는 T-test로 분석하였으며 유의수준 p<0.05으로 유의성을 검증하였다.

   3.1 총페놀 함량 및 총 플라보노이드 함량 어성초에는 많은 생리활성 물질이 존재하는 것으로 알 려져 있어, 본 연구에서는 어성초에 존재하는 항산화물질 이 될 수 있는 총 페놀 함량을 측정하였는데 그 결과가 Fig. 1에 나타나있다.

   extracts from Houttuynia cordata Thunb 결과적으로 총 페놀 함량은 어성초 물추출물에서는 77.8 mM Tannic acid/g extract였고, 70% 에탄올 추출물 은 77.8 mM Tannic acid/g extract로 나타나서 두 추출물 간에 유의적인 차이는 나타나지 않았다. Kim 등[19]은 어 성초를 60% 에탄올로 추출하였더니 총 페놀 함량을 18 mg gallic acid /g extract 얻었다고 하였고, Jeong 등[20] 은 60% 메탄올 추출물에서 17.71 mg/g extract을 얻었다 고 보고하였다. 또한 Tian 등[11]은 어성초차를 여러 용 매를 이용하여 분획하여 총 페놀 함량은 관찰하였는데 분획물중에서도 에틸 아세트산에 추출하였을 때, 408.6 μ g gallic acid/mg fraction으로 나타났다. 이와 같이 어성초 에 관한 연구를 보면 어성초에는 많은 페놀화합물이 존 재하는 것으로 알려져 있는데 대표적으로는 qurcitrin,

   qurcetin, hyperoside 등이 있으며[11] 이들이 존재하므로 써 산화물에 의해 나타나는 질환 간기능 저하[11], 당뇨 [21], 항염증[13] 신장독성 억제[14], 신경보호효과[15]에 우수한 효능을 보이는 것으로 연구되었다. 본 연구에서도 총 페놀함량이 추출물의 다른 조건에서 유의적인 차이를 보여주지 않았으나, 물이나 70%에탄올 추출물에서 모두 존재하는 것으로 나타났다.

   어성초 물 추출물과 70% 에탄올 추출물이 DPPH 라디 칼 소거활성 결과는 Fig. 2와 같다. DPPH 라디칼 소거능 어성초 추출물이 농도가 증가하면서 증가하였고, 추출물 중에서도 70% 에탄올 추출물이 라디칼 소거능이 더 월 등한 것을 관찰할 수 있었다. 농도 2 mg/mL에서 물추출 물은 78.4%를, 70% 에탄올 추출물은 91.8%을 나타내어 유의적으로 70% 에탄올 추출물이 물추출물에 비해 DPPH 라디칼 소거능이 유의적으로 1.17배 높은 것으로 나타났다(p < 0.05).

   *p <0.05 2 mg/mL water vs 70% ethanol extract of Houttuynia cordata Thunb [Fig. 2] DPPH radical scavenging activities of water and 70% ethanol extracts from Houttuynia cordata Thunb Jeong 등[18]은 농도 5 mg/mL 60% 메탄올 추출물의 DPPH 라디칼 소거능을 관찰하였는데 87.79%로 나타나 서 본 연구에서 사용한 70% 에탄올 추출물의 경우가 더 2.5배 낮은 농도에서 91.8% 저해율이 나타났으므로 본 연구의 추출조건이 더 나은 것으로 사료된다. 또한 Tian 등[11]의 연구에서는 추출물을 유기용매로 추출했을 경 우 0.2 mg/mL에서 99.8%로 나타났다. 따라서 추출하는 용매에 따라 라디칼의 소거능이 서로 다르며 어성초에서 도 유지용매에 추출되는 화합물들이 강력한 항산화능을 보이는 것으로 사료된다.

   어성초의 물 추출물과 70% 에탄올 추출물의 ABTS 양 이온 소거활성은 Fig. 3에 나타난바와 같다. 추출물의 농 도가 높을수록 ABTS 양이온 소거능이 증가하였고, ABTS 양이온 소거능도 70% 에탄올 추출물이 유의적으 로 소거능이 높은 것으로 관찰되었다. 농도 2 mg/mL에서 물추출물은 47.7%를, 70% 에탄올 추출물은 54.8%을 나 타내어 유의적으로 70% 에탄올 추출물이 물추출물에 비 해 ABTS 양이온 소거능이 유의적으로 1.15 배 높은 것으 로 나타났다(p < 0.05).

   *p <0.05 2 mg/mL water vs 70% ethanol extract of Houttuynia cordata Thunb [Fig. 4] Ferric reducing power of water and 70% ethanol extracts from Houttuynia cordata Thunb

   본 연구는 여러 생리활성 성분이 다량 함유되어 있다 고 알려진 전통 약용 식물인 어성초의 추출 조건에 따른 항산화력을 관찰하였는데, 추출조건으로는 식용으로 활 용가능한 물 추출과 70% 에탄올 추출을 통해 항산화력 *p <0.05 2 mg/mL water vs 70% ethanol extract of Houttuynia cordata Thunb 을 비교하였다. 결과적으로 총 페놀 함량은 어성초 물추 출물이나 70% 에탄올 추출물 모두 77.8 mM Tannic [Fig. 3] ABTS radical scavenging activities of water and acid/g extract로 나타나 유의적인 차이는 없었고 DPPH 70% ethanol extracts from Houttuynia cordata Thunb 라디칼 소거능은 물 추출물 2 mg/mL 농도에서 78.4%, 70% 에탄올 추출물은 91.8%로 유의적으로 소거능이 Jeong 등[20]은 농도 5 mg/mL 어성초 60% 메탄올 추 70% 에탄올 추출시에 우수한 것으로 나타났다. 또한 출물의 ABTS 양이온 소거활성을 관찰하였는데 99.27% ABTS 양이온 소거능에서도 물 추출물은 2 mg/mL 농도 로 나타나서 본 연구에서 사용한 추출 조건보다는 2배 정 에서 47.7%, 70% 에탄올 추출물에서는 54.8%로 유의적 도 높은 것으로 나타났다. 으로 70% 에탄올 추출물이 저해능이 우수한 것으로 나 타났으며 FRAP 방법으로 통한 환원농도 70% 에탄올 추 출물이 우수한 것으로 관찰되었다. 이와 같은 결과로 어 따른 FRAP 환원력을 Fig. 4에 성초 추출물 조건 중 70% 에탄올 추출 시 항산화력을 높 경우 375.9 μM Trolox/g extract, 일 수 있는 생리활성 성분이 추출되는 것으로 사료되며 70% 860.5 μM Trolox/g extract로 식용 가능한 기능성 식품소재로써 어성초 에탄올 추출물 70% 추출물이 물 추출물에 비해 2.29 배 을 사용할 수 있을 것으로 사료된다. 것으로 나타났다(p < 0.05).
어성초의 추출 조건에 나타내었다. 물 추출물의 에탄올 추출물의 경우 나타나, 에탄올 유의적으로 효과있는